Les débuts Après avoir suivi le cours Florent et intégré le conservatoire d’art dramatique, Jonathan Lambert rejoint Jean-Pierre Coffe en 1994 dans son émission « c’est tout Coffe ».
En 1995, il devient assistant de production chez Case Production, il travaille également comme journaliste pour le magazine de Tf1 « Exclusif » à partir de 1998.
En 1999, il intègre la chaine Comédie et « la grosse émission » et commence à écrire ses sketchs et créer des personnages récurrents qui interviendront régulièrement dans l’émission.
En 2001, il succède à Kad et Olivier à la présentation de l’émission jusqu’en 2002 à l’arrêt de « à grosse émission ».
Parallèlement, il travaille à radio, sur NRJ.
Une plus grande visibilité En 2002, il rejoint Canal + et travaille avec Frédéric Beigbeder, puis il anime l’émission « 22 minutes chrono » en 2003 et retrouve brièvement Kad et O en 2004 pour « samedi soir en direct ».
Il se consacre ensuite à la radio, où sur Europe 2, il accompagne Arthur avec ses multiples personnages déjantés jusqu’en 2006.
En 2007, il intègre l’équipe de Laurent Ruquier dans « on a tout essayé » sur France 2 puis on retrouve Jonathan Lambert dans « on est pas couché » où il continue d’interpréter un personnage ayant un rapport avec un des invités de l’émission.
On retrouve également Jonathan Lambert et Ruquier dans l’émission « on a pas tout dit » en 2008.
En 2009, il est toujours à la radio mais sur Europe 1 avec Nagui.
D’autres horizons En 2004, Jonathan Lambert fait ses débuts au cinéma dans « je préfère qu’on reste amis » de Éric Toledano et Olivier Nakache puis dans « Palais Royal ! » de Valérie Lemercier en 2005.
En 2007, il joue dans « Steak » de Quentin Dupieux.
Cette même année, il sera sur scène avec son one-man show « l’Homme qui ne dort jamais ».
On le retrouve ensuite à l’affiche en 2008 dans « Hero Corp » de Simon Astier puis « la loi de Murphy de Christophe Campos en 2009, « protéger et servir » d’Éric Lavaine en 2010 et la même année dans « l’amour c’est mieux à deux » de Dominique Farrugia et Arnaud Lemort.